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| 品牌 | 美莱博 | 价格区间 | 1-3.5万 |
|---|---|---|---|
| 仪器种类 | 梯度PCR仪 | 产地类别 | 国产 |
| 应用领域 | 医疗卫生,环保,化工,生物产业,制药/生物制药 |
Cycler IIIC 基因扩增仪梯度PCR是专门设计成48孔的个人使用的PCR仪,即只有全尺寸孔板(96孔)的一半。与Cycle III 不同的是,当使用48孔板时,升降温速度可达到4.5 ºC/秒。
该仪器的自动调节式加热盖(100ºC 至 115ºC)的设计降低了样品蒸发的风险,可开启关闭。此加热盖只有当加热块温度设置高于35°C 才会运作。
强大的编程方式让用户易懂直观。几种用户常用的方法已创建成模板,使用户轻易设置zui为复杂的协议程序。屏幕上显示升降温速度,使用户能够监视仪器运作的状况。
Cycler IIIC 基因扩增仪梯度PCR(原文是否漏了C) 的功能具备校准功能。将仪器与校准探头连接,几分钟内便可进行校准。
我们提供四年保修及良好的售后服务。
技术参数:
温度
温度范围:4°C to 99°C
加热块均一性:0.5°C
温度准确度:± 0.5°C
程序结束后可否仍需冷却至环境温度以下?:可
加热/冷却速率
zui大加热速率:4.5°C/秒
zui大冷却速率:3°C/秒
加热盖
加热盖温度设置:100°C to 115°C
加热盖可否开启或关闭?: 可
编程
使用字母键命名程序:是
程序密码保护:是
程序储存量(三步):37
尺寸
高:185 mm
宽:185 mm
长:330 mm
重量:6.8 Kg
电源
交流电:120V 或 230V
订购信息:
产品号 产品描述
Cyl-302-48-02 Cycler IIIC 48 x 0.2ml,120V / 230V
Cyl-302-30-05 Cycler IIIC 30 x 0.5ml,120V / 230V
Cyl-302-48-02B Cycler IIIC 48 x 0.2ml 加热块
Cyl-302-30-05B Cycler IIIC 30 x 0.5ml 加热块
工作原理:
基因扩增仪通过模拟生物体内 DNA 复制过程,在温控环境下完成变性、退火和延伸三个步骤。变性是在 94°C 到 98°C 的高温下,使双链 DNA 分子解链变成单链;退火是将温度降至 50°C 到 65°C,让特定引物与单链 DNA 结合;延伸则是在 72°C 左右,由 DNA 聚合酶对引物进行延伸,合成新的 DNA 链,从而实现目标基因片段的扩增。
主要技术:
实时定量 PCR(qPCR):可实时监控 PCR 反应中的 DNA 扩增情况,采用荧光探针或染料标记,能对 PCR 产物进行定量分析,广泛应用于基因表达分析、病原检测等领域。
数字 PCR(dPCR):将反应体系分成数千个微小反应单元,提高了检测的灵敏度和准确度,适用于低丰度基因的检测和变异分析。
高通量 PCR 技术:能在同一平台上并行处理多个样本,提高实验效率,常用于大规模筛选、基因组学研究和个体化医疗。
结构组成以 DTC 型基因扩增仪为例,主要由外壳、变温反应腔、散热系统、加热系统、制冷系统、电子控制系统、供电系统、人机界面等部分组成。
性能特点:
温度控制精确:如 DTC 型基因扩增仪工作区温度准确性、均匀性和过冲量均≤0.3℃,SEDI 系列 PCR 仪温度精确度可达≤0.2℃,能确保 PCR 反应在合适的温度条件下进行,保证实验结果的可靠性。
升降温速度快:DTC 型基因扩增仪升温≥3℃/S,降温≥2℃/S,SEDI 系列 PCR 仪最高升温速率≥4.8℃/s,最高降温速率≥3.8℃/s,可缩短实验时间,提高实验效率。
功能多样:具备停电保护、长时间高低温处理、低温培养、循环套循环等功能,还能实现 Touch - down PCR 等新型动力学模式,满足不同实验需求。
应用领域:
医学检测:用于疾病的早期诊断,如癌症、遗传病、感染性疾病的分子诊断,还可监测病原体的病毒载量。
法医鉴定:对生物样本中的 DNA 进行分析,用于刑事案件中的确认和亲子鉴定。
食品安全检测:检测食品中的转基因成分、潜在致病菌,确保食品安全。
环境监测:检测水质、空气、土壤等环境样本中的微生物污染情况
基因扩增仪的操作步骤可简化为 “样本与试剂准备→仪器设置→反应运行→结果分析" 四大核心环节,具体流程如下:
1. 前期准备:样本与 PCR 反应体系配制
这是确保实验准确性的关键前提,需在无菌、无核酸污染的环境(如超净工作台)中操作:
试剂准备:按实验需求(如基因检测、表达分析),准备 PCR 预混液(含 DNA 聚合酶、dNTP、缓冲液等)、特异性引物、荧光探针 / 染料、无酶纯水(Nuclease-free Water)及待检测样本(如提取的 DNA/RNA 逆转录产物 cDNA)。
体系配制:根据反应管规格(如 20μL、50μL 体系),按比例在 PCR 反应管中依次加入预混液、引物、探针 / 染料、样本,最后用无酶纯水补足至总体系体积;轻轻吸打混匀,避免产生气泡,若有气泡需短暂离心(如 1000-2000rpm,10-20 秒)去除。
样本摆放:将配制好的反应管(含阳性对照、阴性对照)按预设顺序放入基因扩增仪的反应模块中,盖紧模块盖子(确保温度传导均匀)。
2. 仪器参数设置
通过仪器触摸屏或配套软件(如 StepOne Software)设置 PCR 反应程序,核心参数包括:
温度程序设置:
变性:94-98℃,10-30 秒(使 DNA 解链为单链);
退火:根据引物 Tm 值(通常 50-65℃),10-30 秒(使引物与单链 DNA 特异性结合);
延伸:通常 72℃(Taq 酶最适温度),延伸时间按目标片段长度设定(一般 1kb/min,如 200bp 片段延伸 20 秒);
循环次数根据样本浓度调整(通常 25-40 次);
预变性:通常 94-98℃,2-5 分钟(目的是解链双链 DNA,激活热启动 DNA 聚合酶);
循环阶段(变性→退火→延伸):
终延伸(可选):72℃,5-10 分钟(确保残留单链 DNA 延伸);
保温阶段(可选):4-12℃,避免产物降解(反应结束后短期保存)。
荧光检测设置:若为实时定量 PCR,需选择荧光通道(如 FAM、VIC 通道,匹配探针 / 染料的荧光基团),并设置检测阶段(通常在 “延伸" 或 “退火后")。
样本信息录入:在软件中对应反应管位置,标注样本类型(如 “样本 1"“阳性对照"“阴性对照"),设置目标基因名称等信息。
3. 启动反应与过程监控
确认参数设置无误后,点击 “开始运行",仪器自动进入温控循环;反应过程中,可通过屏幕实时观察温度变化曲线、荧光强度变化(实时定量 PCR),无需人工干预;若仪器具备 “停电保护" 功能,短暂停电后恢复供电可继续运行(需提前开启该功能),避免实验中断
4. 反应结束与结果分析
反应终止:仪器完成预设程序后,会自动提示 “反应结束",可选择进入结果分析界面,或先将反应管取出(若需后续电泳验证),剩余样本可 4℃短期保存或 - 20℃长期保存。
结果分析:
实时定量 PCR:通过软件自动计算 Ct 值(荧光信号达到阈值时的循环数),结合标准曲线(若做绝对定量)或内参基因(若做相对定量,如 ΔΔCt 法),分析样本中目标基因的拷贝数或相对表达量;同时需验证阳性对照有扩增、阴性对照无扩增,确保实验有效;
普通 PCR(仅扩增无实时检测):需将 PCR 产物进行琼脂糖凝胶电泳,通过紫外成像观察是否出现预期大小的条带,判断扩增是否成功。
5. 后续清洁与维护
反应结束后,关闭仪器电源,清洁反应模块(若有液体污染,用无酶纸巾擦拭),定期按仪器说明书进行维护(如校准温度准确性、清洁光学模块),确保仪器稳定运行。
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